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大鼠腸神經(jīng)嵴干細胞

簡要描述:大鼠腸神經(jīng)嵴干細胞分離自腸組織;神經(jīng)嵴干細胞(neuralcrest stem cells,N C SC ),即外周神經(jīng)系統(tǒng)干細胞,起源于胚胎期的神經(jīng)管背側(cè),與中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細胞在形態(tài)學(xué)上有著顯著不同,N C SC 可表達低親和力神經(jīng)營養(yǎng)因子受體p75N T R 而不能分化出少突膠質(zhì)細胞,而中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細胞與之恰好相反。N C SC 可在不同部位分化出多種組織,如神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)、黑色素細胞、內(nèi)

  • 更新時間:2024-07-10
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:374

詳細介紹

品牌YLKBIO貨號YLK-XB1235h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來源腸組織

大鼠腸神經(jīng)嵴干細胞

產(chǎn)品名稱 :大鼠腸神經(jīng)嵴干細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1235h

組織來源 :腸組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

腸神經(jīng)嵴干細胞分離自腸組織;神經(jīng)嵴干細胞(neuralcrest stem cells,N C SC ),即外周神經(jīng)系統(tǒng)干細胞,起源于胚胎期的神經(jīng)管背側(cè),與中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細胞在形態(tài)學(xué)上有著顯著不同,N C SC 可表達低親和力神經(jīng)營養(yǎng)因子受體p75N T R 而不能分化出少突膠質(zhì)細胞,而中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細胞與之恰好相反。N C SC 可在不同部位分化出多種組織,如神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)、黑色素細胞、內(nèi)分泌細胞、平滑肌、骨骼肌及骨等,其中可特異性分化出腸神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)的N C SC ,被稱為腸神經(jīng)嵴干細胞(gutneuralcrest stemcells,G N CSC)。

質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng)  基 : 含B-27 Supplem ent、EG F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 懸浮
細胞形態(tài) : 球形
傳代特性 : 可傳1-3代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 : 1:2
消 化  液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%

該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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